Neoantigen peptidi za imunoterapiju raka

Neoantigen Peptides|Personalizirana sinteza neoantigenskih peptida|Prilagođavanje dugog/nerastvorljivog peptida|Nauka{0}}Peptid

Trebate visokokvalitetne neoantigenske peptide za personaliziranu vakcinu protiv raka ili skrining T-ćelija? Science-Peptide pruža uslugu sinteze neoantigenskih peptida, podržavajući dugačke peptide, refraktorne sekvence, modifikaciju na više-lokacija, visoku čistoću, brzu isporuku, kako bi pomogao u istraživanju imunoterapije tumora. Dobrodošli da nas kontaktirate.

Kao što svi u imunoterapiji tumora znaju, pronalaženje dobre mete nije lako, a sintetiziranje predviđenih neoantigenskih peptida visokog kvaliteta također je izazov. Ovi peptidi su često dugi, netopivi i sadrže hidrofobne aminokiseline, koje je nemoguće sintetizirati normalnim metodama sinteze. Mi smo u polju peptida već 20 godina i primili smo mnogo narudžbi za neoantigen peptide i naišli smo na razne poteškoće - neke je potrebno dostaviti na vrijeme za pacijentov terapijski okvir, neki peptidi se ne mogu dobro razmutiti u vodi, a neki imaju nekoliko mjesta mutacije zajedno. Upravo su nas ta iskustva navela da izgradimo sistem sinteze posebno za neoantigen peptide, a svaki korak, od dizajna rute do strategije prečišćavanja, bio je usmjeren na rješavanje problema.

Neoantigenski peptidi su jednostavno jedinstveni proteinski fragmenti proizvedeni mutacijama u ćelijama raka. Ove mutacije uključuju točkaste mutacije, delecije umetanja i fuzije gena koje rezultiraju sekvencama aminokiselina koje se razlikuju od onih u normalnim stanicama. Kada ovi peptidi budu predstavljeni površini ćelije pomoću MHC molekula, imuni sistem prepoznaje da je "ovo loše" i napada.

U praksi, neoantigen peptidi spadaju u dvije glavne kategorije:

Dugi peptidi (25-35 aa):inkapsulirati mjesto mutacije i okolne sekvence, potrebno ih je progutati dendritskim stanicama, obraditi i zatim prezentirati, što se obično koristi u personaliziranim vakcinama.

Kratki peptidi (8-11 aa):predviđeni ili validirani epitopi koji se vezuju za MHC koji se mogu koristiti za direktnu stimulaciju T ćelija ili za tetramerizaciju.

Bez obzira na to da li se radi o dugom ili kratkom peptidu, sintisajzeri Neoantigen Peptide imaju iste glavobolje: sekvenca je hidrofobna, lako se „udari“ sintisajzerom, prinos je nizak tokom prečišćavanja i mora biti isporučen na vrijeme za liječenje pacijenta.

1. Specijalizacija za duge i nerastvorljive peptide
Veliki dio neoantigenskih peptida koji nam dolaze imaju više od 25 aminokiselina. Konvencionalne metode su često neefikasne u radu sa ovim peptidima. Tokom godina, smislili smo nekoliko načina da se nosimo s njima:

• Fragmentacija: Dugačak peptid se reže na nekoliko segmenata i sintetiše odvojeno, svaki segment se prvo pročišćava, a zatim sastavlja na smoli ili u tečnoj fazi. Na ovaj način je zagarantovan kvalitet svakog segmenta, a veći prinos i čistoća finalnog proizvoda.
• Mikrovalna{0}}potpomognuta sinteza: neke aminokiseline nerado reaguju s grijanjem u mikrotalasnoj pećnici, efikasnost reakcije će se odmah povećati, a manje je-proizvoda.
• Specijalno prečišćavanje rastvaračem: neki peptidi nisu rastvorljivi u uobičajenim rastvaračima, tako da dodajemo DMSO, gvanidin hidrohlorid i druge jake rastvarače tokom prečišćavanja da ih isperemo sa kolone, a oni i dalje mogu da zadrže dobra svojstva nakon liofilizacije.

2. Ni jedno mjesto mutacije ne nedostaje
Suština neoantigenskih peptida leži u tih nekoliko mjesta mutacije, koja se nikada ne mogu pogriješiti prilikom sinteze. Koristimo Fmoc čvrstu-faznu sintezu da direktno uvedemo neprirodne aminokiseline- i pratimo podatke nakon svakog koraka spajanja kako bismo bili sigurni da su aminokiselinske sekvence mjesta mutacije potpuno iste kao i dizajn.

3. Brzina je teška
Terapijski okvir za pacijente s tumorom je toliko širok da su peptidi besmisleni ako kasne. Neoantigen peptidima smo dali zeleno svjetlo:

• kratki peptidi (<20 aa): 10 working days
• Dugi peptidi (20-35 aa): 12-18 radnih dana
• Ubrzano: 7 radnih dana je moguće po dogovoru ako ste u velikoj žurbi

Prošle godine je postojao kupac koji je već organizovao svoje pacijente i čekao da peptidi naprave vakcinu. Nekoliko naših sintisajzera radilo je u smjenama kako bi mu isporučili svih 30 peptida u roku od dvije sedmice.

4. Strogi kriterijumi čistoće i endotoksina
Kada nešto koristite na ljudima, ne možete sebi priuštiti kompromis u pogledu kvaliteta. Nudimo neoantigen peptide:

• Purity:>90%, >95%, >98% Šta god da odaberete
• endotoksin:<2 EU/mg, or customized according to customer requirements
• Mikrobna granica: u skladu sa Farmakopejom
• Preostali rastvarači: u skladu sa ICH Q3C

Izvještaj o COA svakog peptida je praćen HPLC i MS grafovima, a podaci se mogu pratiti, pa ih mnogi kupci direktno uzimaju i stavljaju u deklaraciju.

5. Dotjerivanje se također može obaviti
Neki eksperimenti zahtijevaju "ručicu" za neoantigen peptide:

• Označavanje biotinom: za MHC tetramer
• Fluorescentno označavanje (FITC, TAMRA, Cy5): za protok-kroz bojenje
• Spajanje proteina nosača (KLH, BSA): za imunizaciju životinja
• Modifikacija palmitinske kiseline: poboljšanje cjepiva u pronalaženju limfnih čvorova

Možemo sve zajedno, a da vi ne morate da pronađete dva dobavljača.

1. 20 godina iskustva i mnogo teških problema
Mi smo na ovom polju već 20 godina i naišli smo na sve vrste teških peptida, i imamo način da se nosimo sa dugim lancima, hidrofobnim i ponavljajućim sekvencama koje su zajedničke neoantigen peptidima, i nećemo vam lako reći da to ne možemo. Neki peptidi za koje drugi misle da se ne mogu napraviti, često možemo pronaći izlaz nakon nekoliko dana istraživanja.

2. Držati korak sa tempom liječenja
Liječenje tumora ne može čekati. Brzo-pratili smo program neoantigen peptida, dajući prioritet cijelom procesu od procjene do isporuke. Mnogi kupci su nam kasnije rekli da su nas odabrali jer smo im isporučili peptid u potrebnom roku.

3. Kvalitet se može provjeriti
Bilo da se radi o sirovom peptidu za naučna istraživanja ili peptidu niske čistoće niskog endotoksina visoke čistoće za pretklinička istraživanja, sve ih tretiramo isto: ne manje od jedne inspekcije kvaliteta i ne manje od jednog od podataka koje treba dati. Mnogi kupci direktno kopiraju naš COA izvještaj i stavljaju ga u dokumente deklaracije.

4. Od miligrama do grama, bez zamjene
Rano otkrivanje je samo nekoliko miligrama, toksikološke studije su desetine grama, klinička ispitivanja su stotine grama - od početka do kraja, možemo sve podnijeti. Ne morate mijenjati istu vrstu i ne morate brinuti o tome.

5. Tvoj redosled, kakav znamo samo ti i ja
Nova sekvenca antigena je ključna vrijednost svakog klijenta. Potpisujemo ugovor o povjerljivosti, informacije o projektu su poznate samo nekolicini ljudi u projektnom timu, a sistem podataka je siguran. Za sve ove godine, nikada nije bilo curenja.

Kompanija za ćelijsku terapiju:imaju pacijenta sa uznapredovalim melanomom koji čeka personalizovanu vakcinu. 30 dugih peptida, 25-35 aminokiselina, od kojih je 8 ekstremno hidrofobnih, a učinak prečišćavanja običnim metodama je izuzetno nizak. Koristili smo kondenzaciju fragmenata i specijalne rastvarače za pročišćavanje peptida i sve ih isporučili kupcu u roku od dvije sedmice, a endotoksin je kontroliran da bude ispod 0,05 EU/mg. Kasnije, nakon tretmana pacijenta, nekoliko novih antigen-specifičnih klonova je amplificirano testom T-ćelija, a kupac nas je posebno nazvao da kaže da je "kvalitet peptida mnogo pomogao".

Vrhunski institut za onkologiju: they want to screen a batch of neoantigen-reactive TCRs and need 200 predicted peptides (9-11 aa). We synthesized all the peptides in three weeks using a high-throughput platform, and each peptide was >95% čisto i potvrđeno od strane MS. Kupac je koristio ove peptide da napravi tetramere i testirao nekoliko TCR-a visokog{2}}afiniteta, koji su sada u pretkliničkom razvoju.

Bilo da tek počinjete u pretkliničkim istraživanjima ili ste već u kliničkom ispitivanju i trebate personalizirani peptid za vakcinu, Science-Peptide može to riješiti. Naš tehnički tim je spreman da sasluša vaše potrebe.